Përmbajtje
- Testi ELISA: cili është parimi?
Testi ELISA: cili është parimi?
Përkufizimi: çfarë është testi ELISA?
Teknika e analizës së imunoabsorbimit të enzimës së lidhur - në anglisht Enzyme-Linked Immuno Assay - ose testi ELISA është një test imunologjik që lejon zbulimin ose analizën e molekulave në një kampion biologjik. Ai u konceptua dhe u zhvillua nga dy shkencëtarë suedezë, Peter Perlmann dhe Eva Engvall në Universitetin e Stokholmit në 1971.
Molekulat e analizuara me metodën ELISA janë përgjithësisht proteina. Dhe llojet e mostrave përfshijnë materiale biologjike të lëngshme - plazma, serum, urinë, djersës -, media kulture qelizore ose një proteinë rekombinante - proteinë e prodhuar nga një qelizë, materiali gjenetik i së cilës është ndryshuar nga rikombinimi gjenetik - i pastruar në tretësirë.
Testi ELISA përdoret kryesisht në imunologji për të zbuluar dhe/ose matur praninë e proteinave, antitrupave ose antigjeneve në një kampion. Ky test serologjik zbulon në veçanti antitrupat e prodhuar nga trupi në përgjigje të kontaminimit viral.
Parimi i testit ELISA për sëmundjet infektive
Përdorimi i antitrupave për diagnostikimin e sëmundjeve infektive paraqet një metodë specifike dhe të shpejtë. Teknika ELISA është një teknikë imuno-enzimatike e cila bën të mundur vizualizimin, nga një kampion biologjik, i reaksioneve ndërmjet një antigjeni – një trup i konsideruar si i huaj nga organizmi i gjallë – dhe një antitrupi duke përdorur një reaksion ngjyre të prodhuar nga një shënues enzimë – përgjithësisht fosfataza alkaline dhe peroksidaza – të lidhura më parë me antitrupin. Reagimi i ngjyrës konfirmon identifikimin e bakterit të izoluar ose praninë e virusit të dëshiruar dhe intensiteti i ngjyrës jep një tregues të sasisë së antigjeneve ose antitrupave në kampionin e dhënë.
Llojet e ndryshme të testeve ELISA
Ekzistojnë katër lloje kryesore të testit ELISA:
- ELISA direkt, bën të mundur zbulimin ose matjen e antitrupave. Ai përdor vetëm një antitrup primar;
- ELISA indirekte, më i përdoruri, gjithashtu bën të mundur zbulimin ose analizimin e antitrupave. Përdor një antitrup dytësor që i jep ndjeshmëri më të mirë se ELISA direkte;
- ELISA në konkurs, lejon dozimin e antigjeneve. Prodhuar nga konkurrenca për lidhje, nuk përdor një enzimë;
- ELISA "në sanduiç", lejon dozimin e antigjeneve. Kjo teknikë përdoret zakonisht në kërkime.
Duke përdorur testin ELISA
Testi ELISA përdoret për:
- Gjeni dhe masni antitrupat në serologji për diagnostikimin e sëmundjeve infektive: virologji, parazitologji, bakteriologji etj.;
- Doza e proteinave në përqendrime të ulëta: doza specifike të disa proteinave të plazmës (imunoglobulina E (IgE), ferritin, hormonet proteinike, etj.), shënuesit e tumorit, etj.;
- Doza e molekulave të vogla: hormonet steroide, hormonet tiroide, barnat…
Rastet më të shpeshta: Covid-19, Denge, HIV, Lyme, alergji, shtatzëni
Testi ELISA përdoret veçanërisht për të diagnostikuar shumë sëmundje infektive:
Sëmundjet seksualisht të transmetueshme (SST)
Përfshirë hepatitin, sifilizin, klamidia dhe HIV. I rekomanduar nga autoritetet shëndetësore, është testi kryesor i depistimit të SIDA-s: tregon praninë e antitrupave anti-HIV dhe antigjenit p24 gjashtë javë pas infektimit.
Sëmundjet rajonale ose endemike
Ethet e verdha, sëmundja e virusit Marburg (MVM), Ladengue, sëmundja Lyme, Chikungunya, ethet e Rift Valley, Ebola, ethet Lassa, etj.
Covid-19
Për t'u kryer më shumë se 2 deri në 3 javë pas shfaqjes së simptomave, testi ELISA bën të mundur identifikimin, në më pak se një orë, të pranisë së antitrupave anti-SARS-CoV-2.
Patogjenët viralë që shkaktojnë infeksione prenatale
Toksoplazmoza, rubeola, citomegalovirusi, herpes simplex për shembull.
Raste të tjera
Por ai ka gjetur edhe aplikacione në zbulim:
- Shtatzënitë;
- Sëmundjet autoimune;
- Alergenet ushqimore: përcaktimi sasior i imunoglobulinave totale E (IgE) ndihmon në vlerësimin dhe trajtimin e alergjive;
- Çrregullime hormonale;
- Markerët e tumorit;
- viruset e bimëve;
- Dhe shumë më tepër
Besueshmëria e testit Covid-19
Si pjesë e zbulimit të antitrupave anti-SARS-CoV-2, një studim pilot i kryer në gusht 2020 nga Institut Pasteur, CNRS, Inserm dhe Universiteti i Parisit konfirmon besueshmërinë e testit ELISA: të dyja testet ELISA testohen. e gjithë proteina N e SARS-CoV-2 (ELISA N) ose domeni jashtëqelizor i spikes së virusit (S) si antigjene të synuara. Kjo teknikë do të bënte të mundur identifikimin e antitrupave në më shumë se 90% të rasteve, me një përqindje shumë të ulët false-pozitive prej 1%.
Çmimi dhe rimbursimi i testit ELISA
Të kryera në laboratorë analizash me recetë mjekësore, analizat Elisa kushtojnë rreth 10 euro dhe rimbursohen 100% nga Sigurimi Shëndetësor.
Të kryera në qendrat falas të informacionit, depistimit dhe diagnostikimit (CeGIDD), ato mund të jenë pa pagesë për HIV dhe SARS-CoV-2.